Journal of HIV & Retro Virus Acesso livre

Abstrato

Um imunoensaio de microesferas multiplex e de alto rendimento baseado na proteína não estrutural 1 discrimina três infeções por flavivírus

Wei Kung Wang

Os quatro serotipos do vírus da dengue (DENV) são a principal causa de infeções por arbovírus em humanos. Os recentes surtos do vírus Zika (ZIKV) e as complicações associadas em regiões endémicas de DENV realçam a necessidade crítica de testes sorodiagnósticos sensíveis e específicos. ZIKV e DENV pertencem ao género Flavivirus da família Flaviviridae. Os testes serológicos tradicionais baseados em proteínas do envelope para infeções por flavivírus têm sido dificultados pela extensa reatividade cruzada entre diferentes flavivírus. Neste estudo, desenvolvemos um imunoensaio de microesferas IgG multiplex (MIA) de alto rendimento utilizando as proteínas NS1 do DENV1-DENV4, ZIKV e do vírus do Nilo Ocidental (WNV) para testar amostras de casos confirmados por reação em cadeia da polimerase por transcrição reversa, incluindo infeções primárias por DENV1, DENV2, DENV3, WNV e ZIKV, infeção secundária por DENV e infeção por ZIKV com infeção prévia por DENV. A combinação de quatro MIAs IgG NS1 para DENV revelou uma sensibilidade de 94,3% e uma especificidade de 97,2% para detetar a infeção por DENV. Os MIA IgG NS1 ZIKV e WNV apresentaram uma sensibilidade/especificidade de 100%/87,9% e 86,1%/78,4%, respetivamente. Foi encontrada uma correlação positiva entre as leituras do ensaio imunoenzimático e MIA para diferentes NS1 testados. Consistente com os nossos relatórios anteriores (Tsai et al. Clin Infect Dis 2017, 65:1829-1836; Emerg Infect Dis 2018, 24: 1355-1359), o painel de infeção secundária por DENV apresentou reação cruzada com ZIKV NS1 em IgG MIA e infecção por ZIKV com painel de infecção prévia por DENV reconheceu tanto DENV como ZIKV NS1. Com base na proporção da intensidade de fluorescência mediana relativa de ZIKV NS1 para DENV1 NS1, o IgG MIA pode distinguir a infeção por ZIKV com infeção prévia por DENV e infeção secundária por DENV com uma sensibilidade de 88,9–90,0% e especificidade de 91,7–100,0%. O ensaio multiplex e de alto rendimento pode ser aplicado ao sorodiagnóstico e sorovigilância de infeções por DENV, ZIKV e WNV em regiões endémicas.