Fariba Nayeri, Amir Ramezani, Lars Eng e Annette Theodorsson
Fundamento: Em doentes com sintomas clínicos de infeção respiratória, a rápida identificação dos casos que necessitam de antibioterapia é crucial para evitar o desenvolvimento de múltiplas bactérias resistentes. Os neutrófilos são membros importantes da imunidade inata e as armadilhas extracelulares de neutrófilos (NETs) são libertadas pelos neutrófilos para controlar a infeção microbiana. Aqui desenvolvemos uma ferramenta de diagnóstico acessível, estável, viável e precisa que deteta substâncias carregadas negativamente (por exemplo, oligonucleótidos), no expetorado de doentes com pneumonia, que apresentaram uma reação elevada e instantânea aos corantes de anilina. Avaliámos a capacidade deste novo teste em detetar infeção bacteriana em casos de pneumonia. Métodos: Foi desenvolvido um teste colorimétrico. As sobras de amostras de expetoração (n=467) de doentes com suspeita de pneumonia foram testadas de forma cega através do teste índice. Estes resultados foram comparados com os resultados finais determinados através de avaliações clínicas e laboratoriais independentes realizadas pelo médico do doente. As amostras de expetoração foram posteriormente analisadas por ELISA, ressonância plasmónica de superfície, SDS-PAGE e espectrofotometria ultravioleta-visível.
Resultados: O teste distinguiu pneumonia com elevada precisão (pneumonia adquirida na comunidade e nosocomial, n=73 e controlos n=192 sem infeção, sensibilidade 97,2%, especificidade 78,2%, valor preditivo negativo 96,4% e valor preditivo positivo 82,6). Os resultados foram altamente correlacionados com a presença de fator de crescimento hepático nas amostras (R = 81%). O resultado positivo do teste esteve presente mesmo após a ultrafiltração das amostras em filtros <50 kDa. O espectro UV-vis nas amostras com resultado de teste positivo apresentou um pico a aproximadamente 265 nm que diferiu significativamente dos controlos. Conclusões: A presença de proteínas e ácidos nucleicos no local da infecção bacteriana pode indicar libertação de NETs pelos neutrófilos. O novo teste de rastreio tem o potencial de diagnosticar a pneumonia numa fase precoce e, assim, reduzir a mortalidade e a morbilidade, orientar a prescrição de antibióticos, monitorizar a terapêutica e reduzir os custos, o que é especialmente vital em centros e zonas rurais mal equipados.
Nota: Este trabalho foi apresentado na 8ª Edição da Conferência Internacional sobre Doenças Infecciosas, de 07 a 08 de junho de 2018, Londres, Reino Unido