Insights em Biomedicina Acesso livre

Abstrato

Detecção precoce de cancro colorretal empregando tecnologia xna

Michael J. Powell

Os cientistas da DiaCarta desenvolveram uma tecnologia inovadora de fixação molecular de ácido xenonucleico, ou tecnologia XNA, para satisfazer as necessidades de sensibilidade para a mutação genética tumoral e outras mutações genéticas importantes em amostras de biópsia líquida e FFPE. A tecnologia XNA utiliza oligómeros XNA concebidos de forma proprietária com estruturas modificadas que hibridizam sequências de ADN alvo de interesse através do emparelhamento de bases Watson-Crick. Quando a sequência é uma correspondência completa, os XNAs hibridizam fortemente com as sequências alvo do ADN, bloqueando o alongamento da cadeia pela ADN polimerase na reação de PCR. No entanto, quando está presente uma mutação na sequência alvo, a incompatibilidade leva à instabilidade do duplex oligómero XNA:DNA, permitindo o alongamento da cadeia pela DNA polimerase. Como resultado, apenas a sequência alvo que contém mutações é selecionada para amplificação e a sequência selvagem, apesar de estar presente em quantidades/cópias de ADN muito maiores, não será amplificada. Uma vez que os oligómeros XNA não são reconhecidos pelas ADN polimerases, não podem servir como iniciadores nas reações de PCR em tempo real subsequentes. Os ensaios de pinças moleculares XNA são altamente sensíveis utilizando ácidos nucleicos obtidos a partir de amostras de biópsia líquida ou biópsia de tecido tumoral (FFPE). O limite de deteção (LOD) pode atingir 0,5% (7 ou 8 cópias de ADN mutante) em 5 ng de ctDNA, aproximadamente o equivalente a 2 ml de sangue de um doente. Since the presence of high levels of circulating cell free mutant tumor DNA (ctDNA) and exosome derived nucleic acids has been found to be associated with poor survival in colorectal and other cancers and dynamic monitoring of the level can be used as a predictive factor for cancer tratamento..