Revista de Farmácia e Pesquisa Farmacêutica Acesso livre

Abstrato

Otimização das condições de fermentação para produção extracelular de um fármaco proteico terapêutico uricase, por Aspergillus welwitschiae usando metodologia de superfície de resposta

Noura El-Ahmady El-Naggar, SA Haroun, Eman M El-Weshy e AA Sherief

Introdução A uricase é comumente usada em análises clínicas para a determinação de urato no sangue e outros fluidos biológicos. As uricases microbianas como fármaco proteico foram consideradas eficazes no tratamento de hiperuricemia e gota, bem como na profilaxia e tratamento de hiperuricemia de lise tumoral.

Objetivos : Uma cultura potencial, Aspergillus sp. cepa 1-4 apresentou alta atividade extracelular de uricase. Este isolado fúngico uricolítico foi identificado como Aspergillus welwitschiae cepa 1-4 com base em características fenotípicas, juntamente com análise de sequência da região ITS. O produto de sequenciamento foi depositado no banco de dados GenBank sob o número de acesso MG323529. O delineamento experimental Plackett-Burman com 20 execuções foi aplicado para triagem de quinze variáveis ​​para suas significâncias na produção de uricase por Aspergillus welwitschiae.

Resultados : O tempo de incubação foi a variável mais significativa que afetou a produção de uricase, seguido pelo extrato de levedura e tamanho do inóculo com valores de P significativos de 0,0002, 0,0083 e 0,0118; respectivamente. Essas variáveis ​​foram escolhidas para estudos de otimização usando o delineamento composto central.

Conclusões Foi descoberto que a produção máxima de uricase (59,01 U/mL) por Aspergillus welwitschiae é alcançada nas seguintes condições de fermentação g/L: sacarose 30, ácido úrico 3, peptona 2, extrato de levedura 2, NaNO3 2, K2HPO4 1, MgSO4.7H2O 0,2, NaCl 0,2 e FeSO4.7H2O 0,03???, tempo de incubação 7 dias, temperatura 35, pH 6, tamanho do inóculo 4 mL/50 mL de meio, idade do inóculo 72 h e volume do meio 50 mL/250 mL de frasco cônico. Um aumento geral de 2,5 vezes na produção de uricase por Aspergillus welwitschiae foi alcançado no meio após otimização estatística em comparação com o meio basal não otimizado (23,58 U/mL) antes da aplicação de Plackett-Burman. resultado em TODOS os tratamentos.