American Journal of Drug Delivery and Therapeutics Acesso livre

Abstrato

Cromatografia Avançada 2020: Purificação e caracterização de Peptídeos Antioxidantes da Hidrólise Enzimática do Camarão - Xueqin Liu-Jiangsu Ocean University

Xueqin Liu

Introdução:

Cabeça de camarão Penaeus kerathurus adquirida por mobilização mecânica, foi hidrolisada por tripsina comercial (0,1%). A resposta de hidrólise foi terminada pela inativação térmica do composto (95°C) seguida de centrifugação. Os hidrolisados ​​proteicos criados foram avaliados por investigação bioquímica quanto ao conteúdo proteico, aminoácidos livres absolutos (FAA), azoto essencial imprevisível (TVB-N) e perfil de eletroforese SDS-PAGE. Foram avaliadas as propriedades utilitárias, por exemplo, limite emulsionante, adsorção de gordura e propriedade de formação de espuma. Em comparação com a proteína bruta da cabeça do camarão, os resultados da hidrólise enzimática demonstraram um incremento notável (p < 0,05) na substância proteica e FAA (17,22%). O baixo nível de tripsina utilizado neste teste foi suficiente para solubilizar o substrato, resultando em níveis consideráveis ​​de substância proteica e de TVB-N (<6mg/100g), que foram essencialmente inferiores aos acumulados, tanto quanto possível, para os produtos marinhos.

O desperdício de camarão é uma fonte significativa de astaxantina, que ocorre como um complexo com proteínas, e proteínas isoladas, assim como os carotenóides são conhecidos por terem acção de agente de prevenção do cancro. Os exames foram concluídos para atualizar a hidrólise do desperdício de camarão utilizando uma protease bacteriana para adquirir confinamento de proteínas ricas em ação de agente de prevenção do cancro. O impacto de três factores de procedimento: fixação específica do catalisador ao desperdício, temperatura e tempo de eclosão na recuperação de carotenóides, teor proteico, substância peptídica solúvel corrosiva tricloroácido (TCA) e movimento de procura de cloreto de difenil picril hidrazil (DPPH) foi avaliado através de um plano parcialmente fatorial . O manuseamento de marisco, por exemplo, camarão, cria enormes quantidades de grandes desperdícios, representando cerca de 35-45% do peso total do camarão. Estas joias da coroa são desperdiçadas rapidamente, causando problemas naturais. Além disso, uma vez que o desperdício de camarão é uma fonte rica em proteínas, quitina, carotenóides e catalisadores, foi recentemente demonstrado um prémio impressionante para recuperar estas partes significativas como itens atraentes.

Astaxanthin is the significant carotenoid present in scavanger squander, and happens as carotenoprotein buildings, where carotenoids are bound to proteins. Complexing of carotenoids to protein brings about presentation of different hues in shellfish and gives soundness to carotenoids, which are in any case entirely insecure. Endeavors have been made to recuperate carotenoids from shrimp squander either as carotenoids or as carotenprotein complex. Studies have been done on recuperation of carotenoids and carotenoproteins from shellfish squander. Carotenoids from shrimp squander have been recuperated utilizing dissolvable extraction and oil extraction and its security under various stockpiling conditions has been accounted for. Enzymatic hydrolysis of shrimp squander was found to improve the oil extractability of carotenoids. Carotenoproteins from shrimp waste can be confined by enzymatic and maturation methods. Chelating operators like EDTA and the proteolytic compound trypsin has been utilized to recuperate carotenoprotein from shrimp squander. Trypsin hydrolysis of snow crab squander followed by ammonium sulfate precipitation yielded carotenoprotein with expanded carotenoid content. Sea life organic cancer prevention agent peptides have become a hotpots in multidisciplinary research, for example, current biomedicine. Hydrolysis of shrimp squander with proteases was found to upgrade the carotenoid recuperation. Carotenoids happen as a complex with protein in scavangers and proteases upset the protein-carotenoid bond, along these lines expanding the carotenoid recuperation. Protease treatment for long time upgraded carotenoid recuperation when the objective is to recoup carotenoid either by oil or dissolvable extraction. Be that as it may, if the objective is to separate carotenoprotein, extraordinary hydrolysis may totally disturb this security bringing about lower carotenoid content in the protein detach. Accordingly controlled hydrolysis of shrimp squander with proteases with lower catalyst level at lower temperature will help in acquiring the protein disconnect wealthy in carotenoid content. Shrimp squander is a significant wellspring of astaxanthin, which happen as a complex with proteins, and protein confines just as carotenoids are known to have cell reinforcement movement. Examinations were done to streamline hydrolysis of shrimp squander utilizing a bacterial protease to get cell reinforcement movement rich protein segregate. The impact of three procedure factors in particular chemical fixation to squander, brooding temperature and time on carotenoid recuperation, protein content, trichloro acidic corrosive (TCA) solvent peptide substance and DiPhenyl Picryl Hydrazylchloride (DPPH) rummaging movement was assessed utilizing a partially factorial structure. A high connection coefficient (>0.90) between the watched and the anticipated qualities showed the fittingness of the plan utilized. Most extreme carotenoid recuperation was gotten by hydrolysing the shrimp squander with 0.3 % chemical for 4 h. DPPH radical rummaging action of carotenoprotein confine was especially influenced by protein focus, temperature and time of hydrolysis. The examination showed that so as to acquire the carotenoprotein from shrimp squander with higher carotenoid content hydrolysing with a catalyst grouping of 0.2–0.4 %, at lower temperature of 25–30° upto 4 h is perfect. Be that as it may, so as to get the protein disengage with expanded cancer prevention agent movement hydrolysing at higher temperature of 50 °C, with higher catalyst convergence of 0.5 % for shorter length is increasingly perfect.

Método:

Os desperdícios de camarão de Penaeus indicus envolvendo cabeça e carapaça foram recolhidos num mercado próximo e transferidos para o centro de investigação em condições de refrigeração. O material foi homogeneizado num modelador vertical de mesa (Robo-Coupe) antes da sua utilização. A alcalase, uma protease bacteriana, da M/s Genencor foi utilizada para a hidrólise. Nesta investigação, o pó liofilizado da cola de camarão foi utilizado como material bruto, e a protease entregue pela estirpe criadora de proteases separada do material bruto da cola de camarão foi hidrolisada.

Resultados:

Uma combinação de 10g de pó de camarão foi quebrada em 50 mL de água purificada e o pH da solução foi ajustado para 6,0, utilizando HCl 1M. Nesta altura, a protease ST-1 foi incluída numa proporção de catalisador para substrato. A mistura foi pensada a 50 ºC com agitação. Após 6 horas de eclosão, a mistura foi aquecida a 100ºC durante 15 minutos para inativar a protease ST-1. Precipitação do licor: O arranjo foi arrefecido até aos 40°C e o rota-desapareceu para expelir a água. O etanol anidro foi então incluído e o acerto foi feito às 12 horas. O arranjo foi centrifugado a 8000 rpm durante 15 min e o sobrenadante foi seco sob vácuo para adquirir os peptídeos de cola de camarão (SPs), que foram depois isolados e purgados por uma secção de gel G-25.

Conclusão:

Os efeitos posteriores do teste de ação de reforço celular indicaram que a parte três apresentou uma elevada ação de agente de prevenção do cancro; o segmento três foi reunido e isolado por estágio fluido de alto estágio (RP-HPLC) para adquirir quatro segmentos. O peptídeo confinado do agente de prevenção do cancro apresenta uma elevada ação de varrimento DPPH, geralmente um ótimo movimento de procura de radical hidróxido e ânion superóxido. Os peptídeos de reforço celular têm amplas possibilidades de melhoria em aplicações clínicas, corretivas, restauradoras e alimentares.