Adrian Szczyrba, Aneta HaÅžka-GrysiŅska*, Tadeusz H. Dzido
Hoje em dia, a fitoterapia representa uma das soluções mais comuns no tratamento de sintomas menores e de doenças graves (ex. Doença de Alzheimer) [1]. Na época da investigação dinâmica de novas substâncias biologicamente ativas de origem vegetal, a cromatografia em camada fina de alto desempenho, HPTLC, permite a separação rápida e paralela de inúmeras amostras. A cromatografia planar é facilmente utilizada para a análise de rastreio de extratos de plantas, medicamentos à base de plantas e novas substâncias obtidas por biotransformação. Algumas destas novas substâncias possuem propriedades ácido-base (por exemplo, alcalóides). Em soluções aquosas, podem dissociar-se e apresentar interações diversificadas das formas ionizadas e não ionizadas do composto com a fase móvel e a fase estacionária. Uma ferramenta muito importante que afeta a seletividade e a forma dos picos/manchas de tais substâncias é o pH. Os eluentes tamponados foram comummente utilizados na separação de substâncias com grupos iónicos utilizando cromatografia em coluna de alta eficiência, HPLC, e cromatografia planar, TLC, [2][3] mas não há exemplos de um gradiente de pH de eluente em fase reversa cromatografia de alta performance em camada fina, RP-HPTLC.
O nosso grupo de investigação propõe a implementação do dispositivo protótipo baseado na aplicação de pipeta móvel acionada por mecanismo de impressora 3D para desenvolvimento de cromatogramas. O dispositivo permite desenvolver cromatogramas de camada fina com gradiente de pH num sistema de fase reversa com velocidade controlada do solvente sem fluxo excessivo do eluente na superfície da camada adsorvente [4]. No estudo, foi utilizada a eluição gradual do gradiente de pH para a separação de substâncias selecionadas que apresentam fracas propriedades de base. A utilização do gradiente de pH da fase móvel melhorou a seletividade de separação e o formato dos pontos/zona das substâncias selecionadas.
Foram utilizadas placas de vidro cromatográfico HPTLC RP-18W (Merck) como fase estacionária. A fase móvel era constituída por metanol e um tampão aquoso de pH adequado na gama de 2,5 a 10,5. Serão mostrados os cromatogramas de gradiente de pH obtidos. As vantagens e desvantagens da solução proposta serão discutidas.